引言

测量放射性配体的结合速率时，结合平衡的速率不仅取决于结合速率常数和所用配体量，还取决于其解离速率常数。（为什么？）通过分析来自一种放射性配体浓度的结合数据来拟合结合速率常数的唯一方法是将解离速率常数限制为您在不同实验中确定的值。

确定结合速率常数的替代方法包括全局拟合基于多重放射性配体浓度获得的数据，或分析一个按顺序测量结合和分离速率的实验。

循序渐进

创建一张XY数据表。将时间以分钟为单位输入到X，将特异性结合输入到Y

从特异性结合表中，单击“分析”，选择“非线性回归”，选择“动力学结合方程”窗格，然后选择 结合动力学-一个热浓度。

您必须将Hotnm（[放射性配体]，nM）和Koff（解离速率常数，分钟的倒数）限制为常数值。

模型

Kd=Koff/Kon

L=Hotnm*1e-9

Kob=Kon*L+Koff

Occupancy=L/（L+Kd）

Ymax=Occupancy*Bmax

Y=Ymax*（1 - exp（-1*kob*X））

解读参数

Kon是结合速率常数（M）-1 min-1

Kd是平衡解离常数（摩尔），计算公式为Koff/Kon

Bmax是平衡时的最大结合，外推至最大放射性配体浓度，单位为用于输入Y值的单位。

注释