引言

无竞争性抑制剂与酶-底物复合物结合，但不与游离酶结合。这可以降低有效Vmax和有效Km。底物-速度曲线向下和向左移动。

在存在几种浓度的抑制剂的情况下，通过测量底物速度曲线，可确定竞争性抑制剂的Ki。

循序渐进

创建一张XY数据表。在X列中输入底物浓度，在Y列中输入酶活性。每个数据集（Y列）表示从零开始在不同浓度抑制剂存在下收集的数据。在列标题中输入这些浓度。一定要输入浓度，而非浓度的对数。

输入数据后，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“酶动力学方程”窗格，然后选择无竞争性酶抑制。

模型

VmaxApp=Vmax/（1+I/AlphaKi）

KmApp=Km/（1+I/AlphaKi）

Y=VmaxApp*X/（Kmapp+X）

 

常数I是抑制剂浓度，在每个列标题中输入的值。其约束为等于数据集常数。

参数Vmax、 Km 和 Ki共享，因此Prism拟合整个数据集的一个最佳拟合值。

解读参数

Vmax为最大酶反应速度缺乏抑制剂，采用与Y相同的单位表示

Km 是 米氏常数（缺乏抑制剂），采用与X相同的单位，其描述了在缺乏抑制剂时，底物和酶的相互作用。

AlphaKi 是抑制常数，用在标题栏中输入的与 I 相同的单位表示。其为Ki（非常高，因为无竞争性抑制剂不与酶结合）和α（非常低）之积。不可能分别拟合α和Ki，而只能确定其乘积。有些书将该乘积叫做Ki’。

如果数据不能很好地拟合模型，则考虑改为拟合竞争或非竞争模型。或拟合混合模型抑制更一般的方程。

参考文献                                                                         

方程3.6，见：RA Copeland， 酶抑制剂在药物发现中的评价，Wiley 2005。IBSN:0471686964.RA Copeland， 酶抑制剂在药物发现中的评价，Wiley 2005。IBSN:0471686964.