引言

在高浓度下，一些底物浓度也会抑制酶的活性。在所有已知酶中，约有 20% 会出现底物抑制现象。当两种底物分子能与酶结合，从而阻碍酶的活性时，就会出现这种情况。

步骤

创建 XY 数据表。在 X 列输入底物浓度，在 Y 列输入酶活性。如果有多个实验条件，则将第一个条件放入 A 列，第二个条件放入 B 列，等等。

输入数据后，单击分析，选择非线性回归，选择酶动力学方程面板，然后选择底物抑制。

模型

Y=Vmax*X/(Km + X*(1+X/Ki))

参数

Vmax是在底物不抑制酶活性的情况下的最大酶速，单位与 Y 相同。

Km 是迈克尔斯-门顿常数，单位与 X 相同。

Ki 是 底物结合的解离常数，即两种底物可以结合到一种酶上。其单位与 X 相同。

注意：Prism 7 及以后版本使用的初始值规则与 Prism 6 不同（经过改进）。

为什么该模型并不总是收敛拟合

如果将该模型重新排列，会更容易理解拟合问题：

Y=Vmax/(Km/X + 1 + X/Ki)

Vmax 控制着峰值的高度（但不等于峰值处的 Y 值）。

当 X 值较小时，最后一项趋近于零，因此曲线的早期部分（X 值较小）由 Km 值决定。

相反，当 X 值较大时，第一项趋近于零，因此曲线的后期部分（X 值较大）由 Ki 值决定。

曲线的中间部分则由 Ki 和 Km 共同决定。

有两个原因会导致拟合结果 "模糊"。

•没有足够大范围的 X 值数据点。需要有小于 Km 且大于 Ki 的 X 值，最好有很多 X 值。如果只有曲线中间的数据，就根本没有信息来分别确定 Km 和 Ki。

•曲线的形状虽然看起来像底物抑制曲线，但并不完全正确。换句话说，这些数据确实不符合底物抑制模型。

参考文献                                                                         

公式 5.44，载于 RA Copeland，《 酶》， 第二版，Wiley，2000 年。