在许多实验情况下，可假设一小部分配体与受体（或非特异性位点）结合。在这些情况下，还可假设配体的游离浓度约等于添加的浓度。该假设大幅简化了结合实验的分析，而标准分析方法依赖于这一假设。

在其他情况下，大部分配体与受体（或非特异性位点）结合。这意味着溶液中游离的配体浓度不等于添加的浓度。差异在所有试管或在所有时间均不相同。游离配体浓度因结合而耗尽。

许多研究者使用这条经验法则：如果配体结合少于10%，则不用担心配体耗尽；如果配体结合超过10%，则存在三种选择：

•更改实验条件。在不改变组织数量的情况下增加反应体积。这种方法的不足是需要更多放射性配体，成本高昂。

•测量每根试管中配体的游离浓度。可使用离心或平衡透析，但使用真空过滤去除游离放射性配体相当困难。

•采用可调整添加配体浓度与游离配体浓度之间差异的分析技术。Prism包括此类模型以分析饱和和竞争数据。这些特殊分析仅对放射性配体有效，因此在评估添加配体和结合配体时采用相同的每分钟计数单位。此类方法对荧光配体无效。