引言

在饱和结合实验中，改变放射性配体的浓度，并测量结合度。目标是确定Kd（平衡时结合一半受体位点的配体浓度）和Bmax（最大结合位点数）。

该方程假设您有s提取非特异性，仅分析特异性结合。

该方程仅适用于Hill斜率。如果假设Hill斜率为1.0（对于单体与一个位点的质量作用结合），则使用更简单的方程。

循序渐进

创建一张XY数据表。将放射性配体浓度输入X，将特异性结合速度输入Y。如果您有若干个实验条件，则将第一个输入A列，第二个放入B列，依此类推。

另一种替代方法是，将总结合输入到A列，将非特异性结合输入到B列。然后，使用“删除基线”分析，从A列中减去B列，以创建包含特异性结合的新结果表。

从特异性结合表中，单击分析，选择非线性回归，选择饱和结合方程窗格，然后选择特异性结合和Hill斜率。

模型

Y=Bmax*X^h/（Kd^h + X^h）

请注意，X轴为浓度，而非log（浓度）。

解读参数

Bmax是最大特异性结合，以与Y相同的单位。这是外推到极高浓度的放射性配体的特异性结合，因此，其值几乎始终高于实验测量的任何特异性结合。

Kd是在平衡时达到半最大结合所需的放射性配体浓度，单位与X的相同。如果h=1.0，这是平衡解离常数。如果h不等于1.0，则Kd的分子解读取决于h不为1.0的原因。

h是Hill斜率。一个单体与一个位点没有协同效应时，其等于1.0。其大于1.0时，您会看到如上图所示的S型。受体或配体具有多个具有正协同效应的结合位点时，就会发生这种情况。存在对配体具有不同亲和力的多个结合位点或存在负协同效应时，Hill斜率小于零。

注意，

在版本7之前该方程称为“单位点 - 与Hill斜率特异性结合”。我们从名称中删除了“单位点”，因为如果Hill斜率不等于1.0，则该方程并不能真正描述结合到一个位点。