引言

您可以通过测量未标记配体与放射性配体的竞争性结合来确定其平衡解离常数。

步骤如下

创建 XY 数据表。在 X 列中输入未标记化合物浓度的对数，在 Y 列中输入结合浓度的对数。使用子列输入重复数据。

在数据表中点击分析，选择非线性回归，选择竞争性结合方程面板，然后选择单位点 - 拟合 logEC50。

模型

Y=Bottom + (Top-Bottom)/(1+10^(X-LogIC50))

 

解读参数

顶部 和 底部 是以 Y 轴为单位的高原。

logIC50 是在 Bottom 和 Top 之间半程产生结合的竞争者浓度的对数。

注释

该模型与抑制剂量反应曲线相同。它拟合的对数 IC50 与未标记配体结合的 Ki 不同。Ki 依赖于 IC50、放射性配体的浓度及其结合 Kd。您可以使用不同的方程直接拟合 Ki。

该分析假定只有一个位点，并且结合是可逆的，处于平衡状态。