引言

通过测量放射性配体结合的竞争，可确定未标记配体的平衡解离常数。

循序渐进

创建一张XY数据表。将未标记化合物的浓度的对数输入到X中，并结合到Y中。如果有几个实验条件，将第一个放入A列，第二个放入B列，依此类推。使用子列输入重复项。

在数据表中，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“竞争结合方程”窗格，然后选择 单位点 - 拟合logEC50。

模型

Y=底部+（顶部-底部）/（1+10^（X-LogIC50））

 

解读参数

顶部 和底部均为以Y轴为单位的稳定段。

logIC50 是底部和顶部之间一半结合中的竞争物浓度的对数

注释

该模型与抑制剂量反应曲线相同，其拟合logIC50，与未标记结合配体的Ki不同。Ki取决于IC50、放射性配体的浓度及其结合的Kd。可使用不同方程直接拟合Ki值。

分析假设您有一个位点，该结合可逆且处于平衡状态。