引言
Kcat是转换量-单位时间内每个酶位点转化为产物的底物分子数。如果知道酶位点的浓度，则在分析底物对速度曲线时，可使用Kcat代替Vmax。
模型
Y=Et*kcat*X/（Km+X）
X 为底物浓度。
Y为酶速度。
kcat为转换量-单位时间内每个酶位点将底物转化为产物的次数。这用Y轴的时间单位的倒数来表示。例如，如果Y是每分钟底物的微摩尔数，则kcat是每分钟每个催化位点产生的底物分子数。
Km为Michaelis-Menten常数，单位与X相同。其是达到最大酶速度一半所需的底物浓度。
Et为酶催化位点的浓度。如果酶有多个亚基，则注意Et是催化位点的浓度，可以大于酶分子的浓度。输入的Y值是以每次浓度为单位输入的酶速度。必须以相同浓度单位输入Et（而时间单位由kcat定义）。
Vmax为与Y相同单位的最大酶速度。其未在上述模型中直接显示，其是外推至非常高底物浓度的酶速度，因此几乎总是高于实验中测量的任何速度。其计算方法为Et乘以kcat。
与Michaelis-Menten模型的关系
上文所示曲线与Michaelis-Menten模型定义的曲线相同。将任一模型拟合数据时，将获得相同的曲线，以及相同的Km值。
Michaelis-Menten模型找到了Vmax，这是外推至非常高底物浓度的最大酶速度。其以用于输入Y值（酶活性）时相同的单位表示。通常直接表达（或转化为）摩尔/分钟/毫克蛋白质。Vmax取决于酶位点的数量（Et）和酶将底物转化为产物的速率（kcat）。
如果知道添加到检测中酶位点的浓度（Et），则可以使用上述模型拟合催化常数Kcat。
计算Kcat时，浓度单位相互抵消，因此Kcat以反时间单位表示。其代表转换量-单位时间内每个酶位点转化为产物的底物分子数。
使用Prism拟合模型
1.创建一张XY数据表。将底物浓度输入X，将酶速度输入Y。如果有几个实验条件，则将第一个放入A栏，第二个放入B栏，依此类推。也可以选择Prism的样本数据：酶动力学-Michaelis-Menten
2.输入数据后，点击“分析”，选择非线性回归，选择酶动力学方程窗格，然后选择 Kcat。
3.您必须基于其他实验， 将Et 限制一个常数值。如需限制Et的值，转至“非线性回归”对话框的“限制”选项卡，确保Et旁的下拉列表设置为“常数等于”并输入值。对于样本数据，输入100作为Et值。
如果不知道Et的值，则无法拟合kcat，而是应该拟合Vmax。Prism无法同时拟合kcat和Et，因为这两项参数交织在一起，且底物-速度曲线未给出关于其各自值的信息。
4.根据样本数据，Prism报告Km=5.886，95%置信区间为3.933-7.839。kcat的最佳拟合值为13.53，95%置信区间为11.97-15.09。
注意
•查看所有酶动力学分析假设的列表。
•该方程的曲线与拟合Vmax的方程的曲线完全相同，而非与转换率Kcat拟合的曲线相同。
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