引言

同源 结合实验是一种标记和未标记的配体对受体具有相同亲和力的实验。一般来说，这是因为两者在化学上相同。通过分析不同浓度的未标记配体与一种（或两种更好）浓度的标记配体的竞争来确定受体数量和亲和力。

循序渐进

创建一张XY数据表。将未标记化合物浓度的对数输入X中，并结合到Y中。输入标记配体的浓度（nM）作为列标题。如果使用两种不同浓度的标记配体，会得到更好的结果。

如果有几个实验条件，将第一个放入A列，第二个放入B列，依此类推。使用子列输入副本。

在数据表中，点击“分析”，选择“非线性回归”，选择“竞争结合方程”窗格，然后选择单位点 - 同源。

模型

coldnm=10^（x+9）；冷浓度（nM）

kdnm=10^（logkd+9）；Kd（nM）

Y=（Bmax*HotNM）/（HotNM+ColdNM+KDnm）+Bottom

 

解读参数

logKd平衡解离常数的对数。由于分析是基于标记和未标记配体以相同亲和力结合的假设，logKd适用于两种形式的配体。

Bmax 是c中配体与受体的最大结合pm.代表与所有受体的结合，因此高于曲线顶部稳定段。

NS是非特异性结合的测量，是以Y轴为单位的底部稳定段除以热配体浓度（nM）。换言之，是非特异性结合热配体的一部分。

Prism对曲线进行全局拟合，从所有数据集中找到一个logKd、Bmax和NS的共享值

注释

该模型假设热配体和冷配体与受体同样地结合，且使用两种浓度的热配体（在A列和B列中..）和各种冷配体，其假设添加一小部分的配体结合，因此自由浓度很接近所添加的。