X值为浓度或剂量时,使用该方程。X值为浓度或剂量的对数时,使用相关方程。
许多log(抑制剂)与反应曲线的关系遵循常见对称的西格摩德形状。
如果拥有良好的控制数据,则 将反应标准化 为运行介于0%与100%之间具有意义。该模型假设数据已标准化,因此强制曲线从100%的游程下降到0%。目的是确定抑制剂的IC50 - 引起反应的浓度等于50%。
仅当确定已非常准确定义0%和100%时,拟合一个标准化模型才有意义。如果数据定义了一条完整的西格摩德曲线,最好是拟合整条曲线,并让Prism拟合顶部和底部稳定段。如果数据没有形成完整的西格摩德曲线,但可通过实体控制数据定义底部和顶部,则拟合到标准化模型是更好的选择。
该模型假设剂量反应曲线具有 标准斜率,等于-1.0的Hill斜率(或斜率因子)。这是配体遵循质量作用定律与受体结合时的预期斜率,也是受体刺激产生的第二信使根据质量作用定律与其受体结合时的剂量反应曲线的预期斜率。如果没有很多数据点,请考虑使用标准斜率模型。如果有许多数据点,请选择可变斜率模型,从数据中确定Hill斜率。
创建一张XY数据表。在X中输入抑制剂的浓度。并在Y中以任何方便的单位输入反应结果。在A列中输入一个数据集,并根据需要将B、C...列用于不同的治疗方法。
从数据表中,点击“分析”,选择“非线性回归”,选择方程“剂量反应曲线-抑制”窗格,然后选择方程“[抑制剂] vs. 标准化反应”。
由于EC50的不确定性非常不对称,请务必选择使用似然比非对称法计算置信区间。
双击图表的X轴,然后选择(“设置图表格式”对话框左上角)将轴拉伸到对数标度。
Y=100/(1+X/IC50)
IC50是激动剂浓度,可在底部和顶部之间产生一半反应。与Y=50时的反应不同。取决于用什么单位表示Y,以及底部和顶部的值,IC50可能给出一个不接近“50”的反应。Prism会报告IC50及其对数。