问题：未达到足够高浓度的结合等温线
上图显示了适合特异性结合数据的饱和结合方程，但所有浓度均相对较低（相较结合的Kd），因此数据几乎形成一条直线。饱和度结合模型很好地拟合了数据（实线），曲线周围有95%的狭窄置信区间（虚线）。但查看Bmax和Kd的置信区间（如方框所示）！它们非常宽，甚至下降到负（不可能的）值。基于这些数据，曲线很好拟合数据，但模型中的两项参数（Bmax和Kd）均不符合合理的置信区间。这并不奇怪。数据甚至没有显示出停滞的迹象，因此数据根本未定义Bmax和Kd。
问题是数据与具有大量低亲和力受体（高Bmax高Kd）或较少数量的高亲和力受体（低Bmax低Kd）的系统一致。下图显示了两种可视化方式。左边的图表显示了与上图相同的拟合度，但最佳拟合曲线及其置信区间延伸至更大的浓度。尽管置信区间在点附近很窄，但属于超宽范围，因为其超出了数据的集中范围。右图显示了两种不同的拟合，将Kd限制为等于200 nM或500 nM。曲线非常不同，但都接近数据。
另一种看待这些数据问题的方式是Bmax和Kd具有相关性。Prism可以报告协方差矩阵作为其非线性回归结果的一部分。只有两项参数，在“矩阵”中只有一个值。Kd和Bmax之间的协方差（范围从0.0到1.0）为0.9993。Prism还可以报告每项参数的相关性（范围也可从0.0到1.0）。只有两项参数，两者具有相同的依赖关系，在本示例中为0.9986。这对于Prism来说还不够高，无法宣布结果 模糊，但该指定阈值（依赖关系> 0.9999）为任意值。
在这一点上，人们很容易放弃，因为没有更高浓度的更多数据，什么都不能确定。但在一些系统中，特别是那些使用PET扫描来探测受体的系统，像这样的数据具有典型性。不可能使用更高浓度的配体。
拟合结合潜力
从这些数据中可以学到什么？数据几乎是线性的。这条线的斜率告诉我们什么？斜率，或者说初始斜率，称之为“结合潜力” （1）。不要被术语“潜力”误导。其与势能和热力学无关。相反，其是一种用少量配体来衡量结合程度的方法。
如果您从特特异性结合方程开始，取它相对于X的导数（即浓度），并设X等于零，您将得到特异性结合曲线的初始斜率。结果是，该斜率，结合潜力，等于Bmax/Kd。Bmax的测量单位与数据中的Y值相同。Kd以与X值相同的单位来测量。所以结合潜力的单位等于Y单位除以X单位。
Prism可拟合特异性结合曲线，还可报告Bmax/Kd的比值及其置信区间。如需实现这一点，则需创建一个新用户定义的方程，或（更容易）克隆一个内置方程。然后转至对话框中定义方程的最后一个选项卡。“变换为报告”。选择报告两项参数的比率，并定义分子和分母。
在本示例中，Prism发现结合潜力为242.1，置信区间为183.4至300.7。该置信区间相当窄，因此结果非常有用。
参考文献
1.Innis等人，可逆结合放射性配体体内成像的统一命名法。《脑血流与代谢杂志》（2007），第27（9）卷，第1533-1539页
