引言
动力学实验可以确定未标记化合物的解离和结合速率常数（关-速率和开-速率）。将标记的和未标记的配体加在一起，并随时间测量已标记配体的结合。使用下述适当模型进行拟合，将已标记配体的速率常数限制为从其他实验中确定的恒定值，并拟合未标记化合物的速率常数。
仅使用单一浓度的标记和放射性配体，很难在任何合理的精确度水平上，确定速率常数，但使用两个（或更多）浓度的未标记配体测量动力学数据，结果更精确。
循序渐进
创建一张XY数据表。将时间（分钟）输入X，并将特异性结合（cpm）输入Y。在A列中输入一个浓度的未标记配体的结合，在B列中输入另一个浓度的结合，等等..在列标题中输入浓度（nM）。
从特异性结合表中，单击“分析”，选择“非线性回归”，选择“动力学结合方程”窗格，然后选择“竞争性结合动力学”。
将k1和k2限制为由动力学结合实验确定的常数值。k1是热配体的结合速率常数，单位为M-1 min-1， 和k2是其解离速率常数，单位为min-1。
此外，还将L限制为一个恒定值，等于标记配体的浓度，单位为nM。
将I限制为一个列常数，其值来自列标题。
模型
KA=K1*L*1E-9+k2
KB=K3*I*1e-9+K4
S=SQRT（（KA-KB）^2+4*K1*K3*L*I*1e-18）
KF=0.5 * （Ka+KB+S）
KS=0.5 * （KA+KB - S）
DIFF=KF-KS
Q=Bmax*K1*L*1e-9/DIFF
Y=Q*（k4*DIFF/（KF*KS）+（（K4-Kf）/KF）*exp（-KF*X）-（（K4-KS）/KS）*exp（-KS*X））
解读参数
k3是未标记配体的结合速率常数，单位为M-1 min-1。
k4 是未标记配体的解离速率常数，单位为min-1。
Bmax 是受体总数，要么留作变量，要么设置为您从其他实验中得到的常数。Bmax是使用非常高浓度的放射性配体，在达到平衡状态时的最大结合，它通常比实验中看到的任何结合大得多。
所有三项参数均限制为共用，因此Prism为所有数据集三项参数中的每项参数拟合一个值。
注意
•该方程未考虑配体耗尽，其假设仅一小部分放射性配体与受体结合，因此，放射性配体的游离浓度非常接近增加的浓度。
•仅当早期拥有大量数据点的情况下，这种方法才能给出可靠结果。
•K4/K3比率是冷配体的平衡解离常数（摩尔）。您应该将该值（通过动力学测定）与通过平衡竞争测定的相同值进行比较。
该模型的扩展
Pharmechanics对该方程进行修改，以两种方式，扩展对竞争性结合动力学的分析：
•以不同顺序加入受体、热化合物和冷化合物。竞争性结合动力学方程为最常用的测定形式而设计，其中受体同时暴露于两种配体，即，最后添加受体。存在试剂添加顺序不同的情况，例如，将受体与未标记的化合物或标记的配体预先温育
•与快速解离化合物一起发挥作用。竞争性结合动力学方程是为未标记的配体而开发，这些配体的解离足够慢，拟合能够提供动力学参数的合理估计。当未标记的配体快速解离时，通常会产生不明确的拟合，因为配体过快达到平衡，动力学假设不再适用。在此情况下，如果某方程假设未标记的配体与游离受体快速平衡，则可更好拟合数据。
参考文献
该方法由Motulsky和Mahan在《分子药理学》25:1-9（1984）中进行了描述。
