剂量反应曲线可用于绘制多种实验结果。X 轴绘制的是药物或激素的浓度(或剂量)。Y 轴绘制的是反应,几乎可以是生物功能的任何指标。
"剂量"一词的使用通常比较宽泛。从最严格的意义上讲,该术语仅适用于对动物或人进行的实验,即注射不同剂量的药物。您不知道药物在其作用部位的实际浓度,您只知道您施用的总剂量。然而,"剂量反应曲线"一词也被更宽泛地用于描述体外实验,即应用已知浓度的药物。浓度-反应曲线 "是这类实验结果的一个更精确的标签。剂量反应曲线"一词有时甚至更宽泛地用于指改变温度或电压等其他变量水平的实验。
剂量反应实验通常使用约 5-10 个剂量的激动剂,在对数刻度上等距排列。本示例中,剂量可能为 1、3、10、30、100、300、1000、3000 和 10000 nM。转换成对数后(再四舍五入一下),这些数值的间隔是相等的:0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 和 4.0。
Prism 内置的所有剂量反应曲线有两种形式。一种形式假定 X 是浓度的对数或剂量的对数。另一种形式假定 X 是浓度或剂量。请确保您选择的方程形式与您分析的数据相匹配。
EC50 或 IC50 值的不确定性通常很不对称。所以一定要选择能产生不对称区间的剖面似然法计算置信区间。
在剂量反应曲线中,Y 值是反应。本示例中的反应可能是酶活性、细胞内第二信使的积累、膜电位、激素分泌、心率变化或肌肉收缩。
您可以通过乘以或除以一个常数,将 Y 值变换为新的单位。为此请使用 Prism 的变换分析。变换为新单位不会从根本上改变曲线拟合的结果。
在某些情况下,从实验观测单位到实际单位的转换是非线性的。本示例中,将两个荧光值的比值转换为 Ca++ 的浓度就需要进行非线性变换。拟合剂量反应曲线时应使用哪些 Y 值?非线性回归假定曲线周围的所有散点都是高斯分布,因此您希望使用能使这一假定最真实的单位。在很多情况下,这可能很难确定。