当 X 值为浓度或剂量时,使用该方程。当 X 值是浓度或剂量的对数时,使用相关方程。
许多剂量反应曲线都遵循我们熟悉的正余弦形状。这些曲线通常由四个参数定义:Top、Bottom、Hill 斜率和 EC50(或 IC50)。顶部和底部参数描述了曲线达到高原的值--无限接近但永远达不到这些值。Hill斜率描述的是这两个高点之间的曲线斜率。EC50(或 IC50)指的是将所测得的反应增加(或减少)到最大值的一半(或 50%)所需的激动剂(或拮抗剂)浓度。
不过,"一半"这一概念有多种解读方式。您是否对导致测量响应介于曲线最大值(顶部)和最小值(底部)之间的浓度感兴趣?或者,您想要的是在曲线的最大值(顶部)和某个定义的 "基线 "对照值之间的中间位置测得响应的浓度?
在考虑抑制性数据(测量反应随拮抗剂浓度增加而减小)时,这两个值 分别称为 相对 IC50 和 绝对 IC50。
这是迄今为止最常见的定义,也是人们通常所说的反应 "IC50"。它是使曲线下降到曲线 "顶部 "和 "底部 "高原之间的中点所需的浓度。除非数据归一化为从 0 到 100,否则这 不是 Y 轴上对应 50%的值。
在空白对照(无拮抗剂,测得的最大反应)和某种阳性对照(代表完全抑制的反应)之间引起反应的浓度,有时称为绝对 IC50。在许多情况下,所使用的阳性对照可能是另一种已知能对所测反应产生最大抑制作用的标准药物。通常情况下,这种标准阳性对照测得的反应低于剂量反应曲线的 "底线"。因此,绝对 IC50 和相对 IC50 并不相同。
在某些情况下,绝对 IC50 根本无法计算。例如,本检验示例中的拮抗剂可能只能将测得的反应降低到最大值(空白)的 60%,但不能再降低。在这种情况下,绝对 IC50 将无法定义(拮抗剂浓度的增加无法将测量反应降低到最大反应的 50%)。请务必了解您要报告的 IC50 值,以及该值的含义。
创建 XY 数据表。在 X 中输入激动剂的浓度,在 Y 中以任何方便的单位输入反应。
在数据表中点击分析,选择非线性回归,然后选择方程面板: 剂量-反应-特殊,X 为浓度。然后选择"绝对 IC50,X 为浓度"。
您必须在分析参数对话框的 "约束"选项卡上输入参数 "基线 "的值。请注意该模型中 "基线"和 "底线"之间的重要区别。"底线"是曲线本身底部高原的 Y 值。"基线"是定义 0% - 标准药物最大抑制作用的 Y 值。虽然您 必须对基线进行限制,但也可以考虑对 "顶部"参数进行限制。
Fifty=(Top+Baseline)/2
Y= Bottom + (Top-Bottom)/(1+((Top-Bottom)/(Fifty-Bottom)-1)*(AbsoluteIC50/X)^HillSlope)

顶部 和 底部 是以 Y 轴为单位的高原。
HillSlope描述曲线族的陡度。HillSlope 为 1.0 是标准值,应考虑将 Hill 斜坡限制为 1.0 的恒定值。Hill斜率大于 1.0 则较陡,小于 1.0 则较浅。
基线是 "标准"药物或对照组导致最大抑制反应的测量反应。该值必须由用户在分析参数对话框的约束选项卡中输入。
AbsoluteIC50是拮抗剂的浓度,它能产生介于 Top 和 Baseline 之间一半的反应。这与 Top 和 Bottom 之间半程的反应不同(这是相对 IC50,本分析不报告)。Prism 还会报告对数绝对 IC50。